. Il bollettino biologico. Biologia; Zoologia; biologia; biologia marina. 146 V. M. SEVALA ET AL D. 1500 Q T EZ] Comando S 17 kDa [SJ 7kDa CD 2 kDa frazioni figura 8. L'effetto di parzialmente purificato di insulina emolinfa im- munoreactive frazioni sulla amminoacido incorporazione il TCA pre- cipitahle mantello collare di proteina Helisoma. Tre picchi di immuno- reattività (17 kDa, 7 kDa. e 2 kDa) sono stati trovati in frazioni cromatografiche raccolti da emolinfa eluato come rilevato mediante RIA. Tutte queste frazioni sono stati testati in vitro per la stimolazione della incorporazione di 3[H]-marcato con acidi di munizioni in

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. The Biological bulletin. Biology; Zoology; Biology; Marine Biology. 146 V. M. SEVALA ET AL Q. 1500 Q T EZ] Control S 17 kDa [SJ 7kDa CD 2 kDa Fractions Figure 8. The effect of partially purified hemolymph insulin im- munoreactive fractions on amino acid incorporation into the TCA pre- cipitahle mantle collar protein of Helisoma. Three peaks of immuno- reactivity (17 kDa, 7 kDa. and 2 kDa) were found in the chromatographic fractions collected from hemolymph eluate as detected by RIA. All of these fractions were tested in vitro for the stimulation of incorporation of 3[H]-labeled ammo acids into TCA precipitable protein of the mantle collar of Helisoma. The mantle collars from different snails of known growth rates were dissected and cultured in vitro with and without the immunoreactive fractions (250 nU/m) obtained from the gel filtration column. The mantle collars were processed to measure the label incor- poration into mantle collar proteins (see Methods). The 7 kDa ILP sig- nificantly stimulated amino acid incorporation into mantle collar protein (*, P < 0.05). Columns in the figure indicate the mean of n = 12, bars the SEM from three experiments. c 0) o Q. Q. Q. 7kda 2kDa Fractions Figure 9. The effect of partially purified hemolymph insulin im- munoreactive fractions on the stimulation of incorporation of 3[H]-labeled amino acids into TCA precipitable periostracal protein of Helisoma. The mantle collars were cultured in vitro (similar to Fig. 8) for 48 h and the periostracum produced was collected with a glass pipette and processed (see Methods) for assaying the 3H amino acid incorporation into perios- tracal protein. The 7 kDa ILP significantly stimulated the amino acid incorporation into periostracal protein (**, P 3000 Q. Q ILP ulU/ ml Figure 10. The dose-response curve for the stimulation of incor- poration of 3[H]-labeled amino acids into TCA precipitable mantle collar protein of Helisoma by the partially purified 7 kDa insulin immuno- reactive fract

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